日常使用高效液相色譜儀的要求及維護(hù)方法，話不多說下面一起來了解一下吧。
 

　　一、 流動相的要求
 

　　高效液相色譜儀是樣品組分在柱填料與流動相之間質(zhì)量交換而達(dá)到分離的目的，因此要求流動相具備以下特點：
 

　　1、純度 流動相必須用HPLC級的試劑，使用前過濾除去其中的顆粒性雜質(zhì)和其他物質(zhì)(使用0.45um或更細(xì)的膜過濾)。溶劑所含雜質(zhì)在柱上積累，會影響色譜柱的使用壽命。
 

　　2、溶解度 樣品的溶解度要適宜如果溶解度，如果溶解度欠佳樣品會在柱頭沉淀，不但影響純化分離，還會縮短柱子的使用壽命。
 

　　3、粘度要低(應(yīng)<2cp) 高粘度溶劑會影響溶質(zhì)的擴散、傳質(zhì)，降低柱效，還會使柱壓降增加，使分離時間延長。最好選擇沸點在100℃以下的流動相。
 

　　4、樣品易于回收。應(yīng)選用揮發(fā)性溶劑。
 

　　5、流動相 PH 采用反相色譜法分離弱酸(3≤pKa≤7)或弱堿(7≤pKa≤8)樣品時，通過調(diào)節(jié)流動相的pH值，以抑制樣品組分的解離，增加組分在固定相上的保留，并改善峰形的技術(shù)稱為反相離子抑制技術(shù)。
 

　　對于弱酸，流動相的pH值越小，組分的k值越大，當(dāng)pH值遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于弱酸的pKa值時，弱酸主要以分子形式存在;對弱堿，情況相反。
 

　　分析弱酸樣品時，通常在流動相中加入少量弱酸，常用50mmol/L磷酸鹽緩沖液和1%醋酸溶液;分析弱堿樣品時，通常在流動相中加入少量弱堿，常用50mmol/L磷酸鹽緩沖液和30mmol/L三乙胺溶液。
 

　　二、色譜泵的使用與維護(hù)
 

　　液相色譜泵的使用和維護(hù)注意事項 為了延長泵的使用壽命和維持其輸液的穩(wěn)定性，必須按照下列注意事項進(jìn)行操作：
 

　　1 防止任何固體微粒進(jìn)入泵體，因為塵埃或其它任何雜質(zhì)微粒都會磨損柱塞、密封環(huán)、缸體和單向閥，因此應(yīng)預(yù)先除去流動相中的任何固體微粒。流動相最好在玻璃容器內(nèi)蒸餾，而常用的方法是濾過，可采用Millipore濾膜(0.2µm或0.45µm)等濾器。泵的入口都應(yīng)連接砂濾棒(或片)。輸液泵的濾器應(yīng)經(jīng)常清洗或更換。
 

　　2 泵工作時要留心防止溶劑瓶內(nèi)的流動相被用完，否則空泵運轉(zhuǎn)也會磨損柱塞、缸體或密封環(huán)，最終產(chǎn)生漏液。
 

　　3 輸液泵的工作壓力決不要超過規(guī)定的最高壓力，否則會使高壓密封環(huán)變形，產(chǎn)生漏液。